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10-27
病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定細胞株有什么優(yōu)勢？化學(xué)試劑介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法和電轉(zhuǎn)，整合率低，同時整合位點不穩(wěn)定，易發(fā)生再次丟失的情況，而且整合位點一般都在轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)之外，所以并不是理想的穩(wěn)定整合工具。另外，整合后的拷貝數(shù)是由核內(nèi)的外源DNA局部濃度，而不是轉(zhuǎn)染時的DNA的量決定，而化學(xué)方法在輸入質(zhì)粒載體入核的效率比電轉(zhuǎn)和病毒載體相比要低得多，導(dǎo)致其轉(zhuǎn)染相同細胞所用質(zhì)粒載體用量要大大高于其它方法，造成入核質(zhì)粒載體量難以控制，這也解釋了為什么化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和其它兩種方比，更傾向于得到串聯(lián)多拷貝。以上...
10-19
ATCC細胞復(fù)蘇和培養(yǎng)*手冊細胞是我們很多基礎(chǔ)研究的基礎(chǔ)，那么細胞能否被成功復(fù)蘇就尤為重要了。美國菌種保藏中心，又稱美國模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達兩萬多種。以下是來自ATCC的*說明，小凳子搬起來。01收到細胞的注意事項凍存的ATCC細胞株和雜交瘤細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細胞后，可以立即解凍復(fù)蘇，去除二甲基亞砜（DMSO）后進行細胞培養(yǎng)。如果不立即復(fù)蘇培養(yǎng)細胞...
9-28
白血病細胞株來告訴你白血病的病因一、輻射損傷電離輻射致白血病作用已在動物實驗中得到證實，而對人類的致白血病作用也從以下的事實得到提示：早期不加防護的放射線工作者，其白血病發(fā)病率比一般醫(yī)生高8－9倍；強直性脊柱炎的患者采用放射性治療者，白血病發(fā)病率比一般人高10倍，日本的廣島和長畸原子彈爆炸后，遭受輻射地區(qū)與末遭輻射地區(qū)的居民之間的白血病發(fā)病率相差30倍。二、化學(xué)因素已知很多化學(xué)物質(zhì)有致白血病作用，如工業(yè)中廣泛應(yīng)用的苯。藥物中的抗癌劑（尤以烷化劑）、乙雙嗎啉、氯霉素、保泰松、安...
9-26
我國在腫瘤光動力治療方面有重大進展耐藥是導(dǎo)致腫瘤患者化療失敗的主要原因，是攻克癌癥的一項重大挑戰(zhàn)。光動力治療（photodynamictherapy，PDT）可以利用光激發(fā)卟啉等光敏劑產(chǎn)生活性氧殺死腫瘤細胞，創(chuàng)傷小、毒性小、恢復(fù)快、可保護容貌，并且可利用光動力熒光診斷檢測早期癌或癌前病變，具有無創(chuàng)、快速、客觀等特點。但是，單一的光動力治療后，腫瘤容易復(fù)發(fā)。在國家重點研發(fā)計劃納米科技重點專項項目“基于納米分子影像探針的癌癥微創(chuàng)介入診療導(dǎo)航技術(shù)”的支持下，北京大學(xué)工學(xué)院戴志飛教授...
8-29
微生物菌種保存方法之載體保存法即將微生物吸附在適當(dāng)載體上進行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下幾種，如：①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液，立即在室溫下進行干燥或使菌體繁殖后再干燥，然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜，土壤需風(fēng)干、粉碎、過篩和滅菌。使微生物在土壤中繁殖后進行干燥保存的方法是：取適量土壤(5克)，置于塞有棉塞的試管中，加水或加入充分稀釋的液體培養(yǎng)基(以含水量為土壤大持水量的60%為...
8-22
細胞復(fù)蘇凍存注意事項凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融當(dāng)細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細胞凍存器當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2....
4-20
菌種保存有哪些注意事項從事菌種工作方面的朋友們一定知道，關(guān)于菌種的保藏是一件十分復(fù)雜的事情。那么究竟如何獲得的菌種保存效果呢?主要注意的有三個方面。*就是菌種在保存之前的狀態(tài)。絕大多數(shù)的菌種，保存的都應(yīng)該十它的休眠體，比如說孢子或者是芽孢。而且用來保存的孢子或者是芽孢，應(yīng)該采用的是新鮮的斜面上生長的非常豐滿的培養(yǎng)物。而菌種培養(yǎng)的時間和溫度都會影響到菌種的保存質(zhì)量。如果說培養(yǎng)時間太短，那么保存的時候就容易死亡。而培養(yǎng)的時間如果太長，又容易使菌種的生產(chǎn)性能發(fā)生衰退。一般來說，溫度...
4-20
人前列腺癌細胞；LNCaP特征特性該細胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結(jié)細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長，所以傳代的時候要反復(fù)吹打形成單個細胞；該細胞貼壁不牢，達不到匯合狀態(tài)，而且會使培養(yǎng)基迅速變酸；傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時挪動培養(yǎng)瓶，會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況，需要重新孵育24...
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